一:
革蘭氏染色液試劑盒的檢驗(yàn)原理:
1、通過結(jié)晶紫初染和碘液媒染后,在細(xì)胞壁內(nèi)形成了不溶于水的結(jié)晶紫與碘的復(fù)合物,革蘭氏陽性菌由于其細(xì)胞壁較厚、肽聚糖網(wǎng)層次較多且交聯(lián)致密。
2、故遇乙醇或丙酮脫色處理時(shí),因失水反而使網(wǎng)孔縮小,再加上它不含類脂,故乙醇處理不會(huì)出現(xiàn)縫隙,因此,能把結(jié)晶紫與碘復(fù)合物牢牢留在壁內(nèi)。
3、使其仍呈紫色;而革蘭氏陰性菌因其細(xì)胞壁薄、外膜層類脂含量高、肽聚糖層薄且交聯(lián)度差,在遇脫色劑后,以類脂為主的外膜迅速溶解,薄而松散的肽聚糖網(wǎng)不能阻擋結(jié)晶紫與碘復(fù)合物的溶出。
4、因此通過乙醇脫色后仍呈無色,再經(jīng)沙黃等紅色染料復(fù)染,就使革蘭氏陰性菌呈紅色。
二:革蘭氏染色液試劑盒的操作步驟:
1、標(biāo)本處理:
有菌部位的標(biāo)本,如痰液、糞便、各種拭子、創(chuàng)面等可直接涂片。
無菌部位的標(biāo)本,如腦脊液、胸水、腹水、膽汁、尿液、關(guān)節(jié)液等,應(yīng)取適量標(biāo)本,3000rpm離心10min。取沉渣涂片染色。
2、涂片制作:菌液涂片時(shí),用接種環(huán)沾取菌液點(diǎn)在載玻片上,標(biāo)本可直接在玻片上涂布;菌落涂片時(shí),先取生理鹽水一滴,置玻片上,用接種針挑取菌落在鹽水中涂布。制作的涂片應(yīng)自然干燥,并經(jīng)火焰固定,固定的溫度不宜過高,以玻片背面接觸手背不燙為準(zhǔn),否則可能使細(xì)菌形態(tài)改變。將固定后的涂片進(jìn)行染色。
三:革蘭氏染色液試劑盒的注意事項(xiàng):
1、標(biāo)本涂片不能太厚,嚴(yán)格按操作要求進(jìn)行。
2、玻片通過火焰溫度不能太高。
3、若涂片較厚,應(yīng)延長(zhǎng)脫色時(shí)間,直至不再出現(xiàn)紫色為止。
4、碘液變透明,則不能使用。
5、水洗時(shí)動(dòng)作要輕柔,沿載玻片對(duì)角線方向用洗瓶沖洗,以免把菌體沖掉。
總結(jié):染色液試劑盒的檢驗(yàn)原理及注意事項(xiàng)就由小編分享到這了,看完本文您就應(yīng)該有了基本的認(rèn)識(shí)和了解相信大家都明白了吧!總的來說,希望對(duì)大家有所幫助。